Har du någonsin undrat vad som händer i museets korridorer efter stängningsdags? Larry Daley (Ben Stiller) är en otursförföljd drömmare som tar jobbet som nattvakt på New Yorks naturhistoriska museum. Arbetet verkar enkelt – tills solen går ner.
Larry får upptäcka att det inte är något vanligt museum: en forntida egyptisk förbannelse väcker alla utställningsföremål till liv! Larry måste överleva en natt då Tyrannosaurus Rex vill leka apport, hunnen Attila leder en attack och miniatyrromare utkämpar krig mot cowboydockor.
